Системные и локальные иммунологические нарушения при хронических заболеваниях верхних отделов желудочно-кишечного тракта, ассоциированных с helicobacter pylori, грибами рода candida и protozoa.

Автор: Агафонова Елена Валентиновна

Соавторы: Исаева Гузель Шовхатовна^1,2, Исаева Регина Альбертовна², Маланичева Татьяна Генадьевна², Петрова Дина Наильевна¹

¹ФБУН «Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии» Роспотребнадзора, 

²ФГБОУ ВО «Казанский государственный медицинский университет»

Россия, Казань

Хронические заболевания верхних отделов желудочно-кишечного тракта (ХЗВОЖКТ) рассматриваются как многофакторная патология, в этиологии которой, ведущая роль отводится Helicobacter pylori (НР). В последние годы в ряде исследований показана значимая роль других патогенов глистно-протозойных инвазий, грибов рода Candida, вирусных инфекций и других, инфекционных и неинфекционных агентов [1]. ХЗВОЖКТ рассматриваются как гетерогенная патология, при этом, особое внимание уделяется проблеме protozoа, в частности Lamblia intestinalis, что обусловлено широким распространением этого паразита, приобретают определенную значимость другие protozoа Вlastocystis spp., Entamoeba. Ассоциативные влияния патогенов, формирующих симбиозы, при ХЗВОЖКТ, по-видимому, будут оказывать поликомпонентный эффект на механизмы врожденного и адаптивного иммунитета, формируя и расширяя иммунные дисфункции [2]. Цель исследования – изучение системных и местных иммунных дисфункций при ХЗВОЖКТ, ассоциированных с микст-инфицированием патогенами HP, грибами рода Candida, protozoa (Lamblia intestinalis, Вlastocystis spp., Entamoeba coli и др.).

Обследованы пациенты с ХЗВОЖКТ: хронические гастродуодениты — 53 чел.; язвенная болезнь желудка и 12 перстной кишки- 25 чел. Из них дети (7-16 лет) — 28, взрослые 50 человек. Проводилось комплексное исследование на HP (урезанные скринирующие тесты, антитела к Cog А антигену HP в сыворотке крови, Аg HP, ПЦР). ФГДС проводилась с забором биопсийного материала в антральном и фундальном отделах желудка. Колонизация Candida albicans (CA) подтверждалось культуральными исследованием биоптатов и повышением уровня маннано-протеинового антигена CA в сыворотке крови. Паразитологическое обследование включало «Комплексную систему паразитологической диагностики» (патент N 2018101361), комбинированные гельминтоовоскопические методы – «Способ диагностики аскаридоза» (патент №2368324), «Способ диагностики протозоозов» (патент №2371719). Для проведения иммунофенотипирования были сформированы группы: 1-я (n 11)-моноинфицирование НР, 2-я (n 12) микст-инфицирование 2-х компонентное – НР+CA, 3-я группа-микст-инфицирование 3-х компонентное (n12) – НР+CA+protozoa. Иммунофенотипирование (МКАТ «Becton Dickinson»; FACSCalibur; «Simul Set») включало определение профиля лимфоцитов-Т; Т х; CTL; Т рег.; NК; NКТ; CD4+CD8+ dubl+; CD4-CD8-dubl-; В; В1, В2 и моноцитов- «классические» (СD14+16-) и провоспалительные/супрессорные (СD14++16+). Оценивали экспрессию маркеров активации на лимфоцитах и моноцитах – CD3+HLADR+ (активированныеТ-л), CD8+HLADR+ (активированные СTL-л) CD14+HLADR+. Исследование локального цитокинового профиля (ЛЦП) в биоптатах cо слизистой оболочки желудка (ИФА) включало — определение TNF-α, IL-1, IL-10, IFN- γ (“Вектор-Бест”, Россия) и уровень мембранного маркера апоптоза s CD95 (sAPO-1/FAS) (Bender MedSystems GmbH, Austria). Локальный цитокиновый профиль исследовали в группах 1 (N= 17); 2 (N=14); 3 (N= 16). Группу сравнения составили 12 пациентов с ХГД (HP -).

При микст-инфицировании (группы 2 и 3), по сравнению с группой 1 выявлено изменение популяционного профиля лимфоцитов- снижение абсолютного содержания Т л (CD3+CD19-, p < 0,05) и повышение NК (СD3-CD16/56+; p < 0,05) лимфоцитов. Субпопуляционный профиль при микст-инфицировании характеризовался снижением относительного содержания Тх в группе 2 (p < 0,05), относительного и абсолютного содержания Тх в группе 3 (при микст инфицировании НР+CA+protozoa; p<0,05). В обеих группах при микст-инфицировании регистрировалось повышение субпопуляции В1 (СD5+CD19+; p < 0,05) и снижение В2 (СD5-CD19+; p<0,05). В группе 3 при 3-х компонентном микст-инфицировании отмечено нарастание субпопуляции CD4+CD25+Hi (Тreg.; p < 0,05). Повышение Treg. приводит к ослаблению эффективности протективного иммунитета, способствуя проявлению инфекционного синдрома, нарастанию инфицирования патогенами и формированию 3-х компонентного микст-инфицирования. В обеих группах показано увеличение индуцированных на периферии регуляторных субпопуляций-CD4+CD8+dubl+(p < 0,05), СD3-CD4-CD8-dubl- (p < 0,05) и повышение субпопуляции NКТ (CD3+CD16/56+; p < 0,05) лимфоцитов. Выявлены изменения в структуре циркулирующего пула моноцитов (группы 2 и 3) в сторону снижения СD14+16- (p < 0,05) и повышения СD14++16+ (p < 0,05) клеток с высоким уровнем провоспалительной/супрессорной активностью, обусловленной продукцией IL-10. При изучении локального цитокинового профиля в группах 2 и 3 отмечено нарастание уровней провоспалительных цитокинов — IL 1 (40,9;30,1 пг/мл; p < 0,05) и TNF-α (30,1; 42,1 пг/мл; p < 0,05), что свидетельствует о активации (усилении) локального воспаления. При микст-инфицировании нарастал уровень sCD95 (17,5±1,6; 17,9±1,8; p < 0,05), отражающий уровень усиления апоптоза эпителиоцитов, их повреждение и деструкцию. В группах 2 и 3 отмечалось выраженное нарастание уровня IL 10 (44,8; 45,8; p < 0,05). IL 10-важнейший противовоспалительный цитокин, связанный с патоген-индуцированной иммуносупрессией. Увеличение выработки IL 10 играет ключевую роль в реализации cтратегии «саботажа» патогенами иммунной системы хозяина. В группах 2 и 3 отмечено выраженное снижении IFNγ (1,0 ±0,2; 0,3 ±0,8; p < 0,05). Патогены, при микст инфицировании, подавляют продукцию интерферонов или блокируют эффекты их действия. Нарушение передачи сигнала от IFNγ к факторам врожденного иммунитета также, является важнейшим механизмом супрессии иммунного ответа в рамках стратегии «саботажа» патогенами иммунной системы хозяина.

Таким образом, при ХЗВОЖКТ, ассоциированных с НP, СA и protozoа получены новые данные о формировании дисфункций иммунной системы, связанные с изменением профиля популяций и субпопуляций лимфоцитов и моноцитов, увеличением субпопуляций с регуляторной/супрессорной и цитотоксической активностью, изменением функциональной активности иммунокомпетентных клеток. Показаны дифференцированные изменениями в зависимости от микст-инфицирования патогенами.

Выявлены дифференцированные особенности ЛЦП — нарастание секреция ИЛ-10, угнетение синтез IFN-γ, что ограничивает способность к элиминации патогенов и определяет рецидивирование ХЗВОЖКТ, ассоциированных с НP, СA и protozoа.

Список использованной литературы.

1. Маланичева Т. Г., Зиатдинова Н.В., Файзуллина Р.А., Нарыков Р. Х.  Иммунологические нарушения у детей с хронической гастродуоденальной патологией. Практическая медицина 2011, 5,16-19.

2. Moraes-Vasconcelos D., Orii N. M., Romano C. C. et al. Characterization of the cellular immune function of patients with chronic gastrointestinal tract. Clin. Exp. Immunol. 2008. 2(suppl.), 247-253.