Определение спектра специфичных цитокинов для диагностики анкилозирующего спондилита, ревматоидного и псориатического артритов.

Автор: Козлова Дарья Игоревна¹

Соавторы: В.В. Хижа¹, А.В. Рыбаков², М.Е. Шевалдина², К.А. Юрьева³.

¹Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институтэволюционной физиологии и биохимии им. И. М. Сеченова Российской академии наук.

²Федеральное государственное автономное образовательное учреждениевысшего образования «Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого».

³Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования “Санкт-Петербургский государственный университет”

Россия, Санкт-Петербург

Ревматоидный артрит (РА), анкилозирующий спондилит (болезни Бехтерева, ББ) и псориатический артрит (ПА) приводят к развитию необратимых изменений суставов и системного воспалительного процесса. Важной задачей является поиск маркеров, позволяющих дифференцировать данные заболевания друг от друга на этапе ранних симптомов, а также оценивать их активность в процессе применения тех или иных терапевтических стратегий. В связи с этим нами была поставлена цель определить перечень цитокинов, позволяющих дифференцировать РА, ПА и АС, а также производить динамическую оценку их активности.

В исследовании приняли участие 110 пациентов, из которых: 65 – РА, 23 – ПА и 22 – АС. Группы были выровнены по возрасту и полу. Все пациенты дали добровольное информированное согласие на участие в исследовании. Исследование проводили с использованием гепаринизированной плазмы крови пациентов. Методами твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) и мультиплексного иммуноанализа с Milliplex, Merсk (Millipore) в полученных образцах определяли содержание 48 различных хемокинов/цитокинов, а также кальпротектина и белка 14-3-3эта. Полученные данные анализировали с использованием пакета статистических программ SPSS 22 для выявления перечня цитокинов, которые с наибольшей чувствительностью и специфичностью позволяют производить дифференциациальную диагностику данных патологий.

Результаты проведенного исследования показали, что для дифференциальной диагностики РА, ПА и ББ оптимальным является набор следующих цитокинов: белок 14-3-3 эта, кальпротектин (КП), интерлейкины-1 бета, 4, 6, 17, 18 (ИЛ-1β, 4, 6, 17, 18), фактор некроза опухолей-альфа (ФНО-α). Максимальное содержание цитокинов по группам распределилось следующим образом: 1. РА – 14-3-3эта, КП, Ил-4, 6, 17, 18, 1 бета и ФНО-альфа; 2. АС – ИЛ-6 и 17. При ПА указанные цитокины существенно снижены, но в несколько раз выше, чем у контрольной группы доноров. Содержание КП при всех исследованных патологиях было одинаковым, что подтверждает выдвинутое нами ранее предположение о том, что данный маркер повышается в ответ на вовлечение в воспаление суставов и чем больше суставов затронуто, тем выше данный параметр. По нему невозможно отличить РА, ПА и АС, однако его использование совместно с определением содержания белка 14-3-3эта позволяет проводить оценку активности заболеваний, уже дифференцированных между собой по другим цитокинам. Для удобства использования данных параметров в нашей лаборатории разработан, и в настоящее время проходит этап патентования, расчетный диагностический индекс, сочетающий в себе общепринятую диагностику подсчета числа припухших суставов, оценки состояния больного на основе решения врача о смене терапии и определения содержания указанных маркеров в плазме крови пациента.

Таким образом, дифференциацию РА, ПА и АС наиболее четко можно произвести, определив содержание Ил-4, 6, 17, 18, 1 бета и ФНО-альфа, а АС и ПА – ИЛ-6 и 17. Оценку активности в рамках каждого диагностированного заболевания наиболее четко позволяет проводить определение содержания в плазме крови КП и белка 14-3-3 эта. Данные, полученные в результате проведенного исследования, в настоящий момент проходят стадию адаптации к условиям применения в рамках клинической лабораторной диагностики с целью дальнейшей разработки комплексной планшетной тест-системы.