ВЛИЯНИЕ ДЕКСАМЕТАЗОНА НА РЕГУЛЯЦИЮ ПРОГРАММИРУЕМОЙ КЛЕТОЧНОЙ ГИБЕЛИ ЛИМФОЦИТОВ БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ ⋆ Вестник аллерголога-иммунолога
ВЛИЯНИЕ ДЕКСАМЕТАЗОНА НА РЕГУЛЯЦИЮ ПРОГРАММИРУЕМОЙ КЛЕТОЧНОЙ ГИБЕЛИ ЛИМФОЦИТОВ БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ

ВЛИЯНИЕ ДЕКСАМЕТАЗОНА НА РЕГУЛЯЦИЮ ПРОГРАММИРУЕМОЙ КЛЕТОЧНОЙ ГИБЕЛИ ЛИМФОЦИТОВ БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ

28.11.2023
70 0
ФИО: Богомазова Арина Алексеевна
Соавторы: Богомазова А.А., Скибо Ю.В., Абрамова З.И., Решетникова И.Д.
Направление: Аллергология
Название учреждения: Казанский (Приволжский) федеральный университет
Страна: Россия
Город: Казань
Телефон: +7 (939) 396-00-98
Почта: arnbgmz@yandex.ru
 
ВЛИЯНИЕ ДЕКСАМЕТАЗОНА НА РЕГУЛЯЦИЮ ПРОГРАММИРУЕМОЙ КЛЕТОЧНОЙ ГИБЕЛИ ЛИМФОЦИТОВ БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ
 
Богомазова А. А., Скибо Ю. В., Абрамова З. И., Решетникова И.Д.
Казанский (Приволжский) Федеральный Университет, г. Казань, Россия
 
Атопическая бронхиальная астма — это хроническое заболевание, характеризуемое обструкцией дыхательных путей, бронхиальной гиперреактивностью и повышенной активацией иммунных клеток, в особенности Т-лимфоцитов, приводящей к хроническому
воспалению. Известно, что лимфоциты больных астмой имеют нарушенный ответ на программируемую клеточную гибель (ПКГ) 1 и 2 типа – апоптоз и аутофагию, что способствует пролонгации и усилению воспалительного процесса. В сравнении с
апоптозом, аутофагия также может способствовать выживанию клетки в условиях стресса, а её нарушение и гиперактивация приводить к отягощению аллергических реакций [1]. Основными препаратами, применяемыми при бронхиальной астме, являются
глюкокортикоиды, которые активируют глюкокортикоидный рецептор, запускающий в клетке противовоспалительный ответ и, в частности, апоптоз. Несмотря на доказанное влияние нарушения ПКГ на течение бронхиальной астмы, действие синтетических
глюкокортикоидов на аутофагию до сих пор не изучено. Поэтому целью работы является характеристика влияния дексаметазона на регуляцию программируемой клеточной гибели лимфоцитов больных средней и тяжёлой формой атопической бронхиальной астмы.
 
Материалом исследования служили образцы периферической крови 24 пациентов в возрасте от 20 до 45 лет с установленным диагнозом атопической бронхиальной астмой средней и тяжелой степени и 9 условно здоровых доноров. Лимфоцитарную фракцию
выделяли на градиенте плотности фиколла и культивировали с добавлением и без добавления дексаметазона в условиях истощения питательных веществ 0 суток и 6 суток. Морфологические маркеры ПКГ клеток после культивирования детектировали с помощью
просвечивающей электронной микроскопии. Для определения параметров клеточного цикла использовали окрашивание йодидом пропидия и последующий анализ на проточном цитофлуориметре. Уровень экспрессии генов BECN1, LC3, CASP3, BCL2
определяли методом ПЦР в реальном времени.
 
Просвечивающая электронная микроскопия показала, что при кратковременном культивировании без дексаметазона морфологические маркеры аутофагии более ярко выражены у больных АБА, а при длительном культивировании с дексаметазоном у
пациентов наблюдались основные маркёры апоптоза. Анализ параметров клеточного цикла показал статистически достоверное повышение количества клеток в G0/G1 фазе через 2 часа культивирования под воздействием дексаметазона у больных бронхиальной
астмой. По результатам исследования, при длительном культивировании экспрессия гена BECN1 у здоровых доноров повышалась под влиянием дексаметазона, при этом у группы пациентов с астмой уровень экспрессии оставался неизменным. Уровень экспрессии гена LC3, основного маркера аутофагии, повышался под воздействием дексаметазона по сравнению с необработанными лекарством лимфоцитами. Вне зависимости от времени культивирования, дексаметазон повышал уровень экспрессии BCL2 в обоих исследуемых группах. Уровень экспрессии гена CASP3 повышался при длительном культивировании с дексаметазоном, при этом у пациентов с АБА был значительно выше, чем в группе контроля.
 
Таким образом, данная работа демонстрирует различия в ответе лимфоцитов больных и здоровых доноров на терапию синтетическими глюкокортикоидами, а также указывает на нарушение регуляции 1 и 2 типа ПКГ лимфоцитов у пациентов с астмой под
воздействием дексаметазона. Несмотря на противоречивость современных данных о влиянии аутофагии иммунных клеток на аллергическое воспаление [2], результаты подтверждают ее значимость в патогенезе заболевания.
 
Работа выполнена за счет средств субсидии, выделенной в рамках государственной поддержки Казанского (Приволжского) федерального университета в целях повышения его конкурентоспособности среди ведущих мировых научно-образовательных центров «Приоритет 2030»
 
Список литературы:
[1] Ichimiya T., Yamakawa T., Hirano T., Yokoyama Y., Hayashi Y., Hirayama D., и др. Autophagy and Autophagy-Related Diseases: A Review // Int J Mol Sci. 2020; Vol. 21 N 23 P. 8974 doi:10.3390/ijms21238974
[2] Ban G., Pham D., Trinh T., Lee S., Suh D., Yang E. Autophagy mechanisms in sputum and peripheral blood cells of patients with severe asthma: a new therapeutic target // Clinical & Experimental Allergy. 2015; Vol. 46 N 1 P. 48-59. doi:10.1111/cea.12585
 
Автор, ответственный за переписку:
Богомазова Арина Алексеевна; Казанский (Приволжский) федеральный университет; адрес: Россия, 420008, Казань, ул. Кремлевская, 18; лаборант-исследователь; e-mail: arnbgmz @ yandex . ru ; телефон: +79393960098;
 
Соавторы:
Скибо Юлия Валерьевна; Казанский (Приволжский) федеральный университет; адрес: Россия, 420008, Казань, ул. Кремлевская, 18; старший научный сотрудник; кандидат биологических наук; телефон: +7988 833-66-80; e-mail: yuliya_ksu@mail.ru
Абрамова Зинаида Ивановна; Казанский (Приволжский) федеральный университет; адрес: Россия, 420008, Казань, ул. Кремлевская, 18; главный научный сотрудник; доктор биологических наук, профессор; e-mail: Zinaida.Abramova@kpfu.ru
Решетникова Ирина Дмитриевна; Казанский (Приволжский) федеральный университет; адрес: Россия, 420012, Казань, ул. Волкова, 18; доцент кафедры внутренних болезней; кандидат медицинских наук; e-mail: reshira@mail.ru; телефон: +7 903 305-18-16
 
DEXAMETHASONE EFFECTS ON THE REGULATION OF PROGRAMMED CELL DEATH OF LYMPHOCYTES IN PATIENTS WITH BRONCHIAL ASTHMA
Bogomazova A. A., Skibo Y.V., Abramova Z. I., Reshetnikova I. D.
Kazan (Volga Region) Federal University, Kazan, Russia
 
Atopic asthma is a chronic disease characterized by airway obstruction, bronchial hyper-responsiveness, and increased activation of immune cells, especially T lymphocytes, leading to chronic inflammation. It is known that lymphocytes of patients with asthma have an impaired
response to programmed cell death (PCD) types 1 and 2 – apoptosis and autophagy, which contributes to the prolongation and intensification of the inflammatory process. Compared to apoptosis, autophagy can also promote cell survival under stress conditions, and its disruption
and hyperactivation lead to aggravation of allergic reactions [1]. The main therapy used for bronchial asthma are glucocorticoids, which activate the glucocorticoid receptor and triggers an anti-inflammatory response in the cell and apoptosis. Despite the proven influence of PCG
disruption on the course of bronchial asthma, the effect of synthetic glucocorticoids on autophagy has not yet been studied. Therefore, the purpose of the work is to characterize the effect of dexamethasone on the regulation of programmed cell death of lymphocytes in patients
with moderate and severe forms of atopic bronchial asthma.
 
The study was performed on peripheral blood samples from 24 patients aged 20 to 45 years with a confirmed diagnosis of moderate and severe atopic bronchial asthma and 9 healthy donors. The lymphocyte fraction was isolated on a Ficoll density gradient and cultured with and
without the addition of dexamethasone under nutrient depletion conditions for 0 days and 6 days. Morphological markers of PCG after cultivation were detected using transmission electron microscopy. Propidium iodide staining, and subsequent flow cytometry analysis were used to
determine cell cycle parameters. The expression level of the genes BECN1, LC3, CASP3, BCL2 was determined by real-time PCR.
 
Transmission electron microscopy showed that with short-term cultivation without dexamethasone morphological markers of autophagy are more pronounced in patients with bronchial asthma, and with long-term cultivation with dexamethasone the main markers of apoptosis were observed in patients. Analysis of cell cycle parameters showed a statistically significant increase in the number of cells in the G0/G1 phase after 2 hours of cultivation under the influence of dexamethasone in patients with bronchial asthma. According to the results of the study, during long-term cultivation the expression of the BECN1 gene in healthy donors increased under the influence of dexamethasone, while in the group of patients with asthma the expression level remained unchanged. Expression of the LC3 gene, a major marker of autophagy, was increased by dexamethasone compared to untreated lymphocytes. Dexamethasone also increased the expression level of BCL2 in both study groups at any time of cultivation. The expression level of the CASP3 gene increased during long-term cultivation with dexamethasone and was significantly higher in patients with asthma than in the control group.
 
Thus, the study demonstrates differences in the response of lymphocytes from healthy donors and patients with asthma to synthetic glucocorticoids and indicates dysregulation of type 1 and type 2 lymphocytes PCG in patients with asthma under the influence of dexamethasone. Despite the contradictory nature of current data on the effect of immune cell autophagy on allergic inflammation [2], the results confirm its importance in the pathogenesis of the disease.
 
The work is carried out in accordance with the Strategic Academic Leadership Program “Priority 2030” of the Kazan Federal University of the Government of the Russian Federation
 
References:
[1] Ichimiya T, Yamakawa T, Hirano T, Yokoyama Y, Hayashi Y, Hirayama D. Autophagy and Autophagy-Related Diseases: A Review. Int J Mol Sci. 2020;21(23):8974. doi:10.3390/ijms21238974
[2] Ban G, Pham D, Trinh T, Lee S, Suh D, Yang E. Autophagy mechanisms in sputum and peripheral blood cells of patients with severe asthma: a new therapeutic target. Clinical & Experimental Allergy. 2015;46(1):48-59. doi:10.1111/cea.12585
 
Author responsible for correspondence:
Bogomazova Arina Alekseevna; Kazan (Volga Region) Federal University; address: 18 Kremlevskaya St., Kazan, 420008, Russia; research laboratory assistant; e-mail: arnbgmz@yandex.ru ; phone: +79393960098.
 
Contributors:
Skibo Julia Valeryevna; Kazan (Volga Region) Federal University; address: Russia, 420008, Kazan, Kremlevskaya str. 18; senior researcher; PhD in Biology; phone: +79888336680; e-mail: yuliya_ksu@mail.ru
Abramova Zinaida Ivanovna; Kazan (Volga Region) Federal University; address: Russia, 420008, Kazan, 18 Kremlevskaya str.; chief researcher; Doctor of Biology, Professor; e-mail: Zinaida.Abramova@kpfu.ru
Reshetnikova Irina Dmitrievna; Kazan State Medical University; address: Russia, 420012, Kazan, 18 Volkova str.; Assistant Professor of the Department of Internal Medicine; PhD in Medicine; email: reshira@mail.ru; phone: +7 903 305-18-16

Комментарии (0)

Читайте также

layBaseline Patient Characteristics, Comorbidities, Prior Medication Use, and Reasons for Dupilumab Initiation in Adult Patients in Russia With Atopic Dermatitis: Real-World Insights Into the GLOBOSTAD Multinational Prospective Observational Study

Baseline Patient Characteristics, Comorbidities, Prior...

ФИО: Daria S. Fomina
Соавторы: Daria S. Fomina1,2,3, Konstantin Raznatovsky4, Natalia Makhneva5, Jiangming Wu6, Marius Ardeleanu7, Kwinten Bosman8
Направление: Дерматология
Название...

28.11.2023
96 0
layСенсибилизация к splA протеиназе золотистого стафилококка у больных аллергическим ринитом и атопической бронхиальной астмой

Сенсибилизация к splA протеиназе золотистого стафилококка...

ФИО: Тюрин Юрий Александрович 1,заведующий лабораторией иммунологии и разработки аллергенов, ведущий научный сотрубник доктор медицинских наук
Соавторы: Фассахов Рустэм Салахович2,...

28.11.2023
166 0

Новости

ЧИТАТЬ ДАЛЕЕ

Статьи

ЧИТАТЬ ДАЛЕЕ

Мероприятия

ВСЕ МЕРОПРИЯТИЯ

Газета

Содержание № 19-20/2023
Содержание № 19-20/2023

    АРХИВ НОМЕРОВ
    Авторы номера
    • Автор: Наталья Ивановна Ильина


      доктор медицинских наук, профессор, генеральный директор Российской ассоциации аллергологов и клинических иммунологов (РААКИ), заместитель директора по клинической работе ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России

    • Автор: Авторы номера

    ВСЕ АВТОРЫ

    База знаний

    ЧИТАТЬ ДАЛЕЕ
    Этот сайт использует файлы cookie. Продолжая просматривать сайт, вы подтверждаете, что были проинформированы об использовании файлов cookie сайтом и согласны с нашими условиями обработки и хранения персональных данных.
    Подтвердить
    Отклонить
    Политика конфиденциальности