Влияние генетических маркеров на клеточные факторы иммунитета у женщин с невынашиванием беременности.

Автор: Логинова Юлия Владимировна

Соавторы: Абрамовских Ольга Сергеевна, д.м.н, доцент

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение «Южно-Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Россия, Челябинск

Невынашивание беременности (НБ) – это самопроизвольное прерывание беременности на сроках от зачатия до 37 недели, считая с первого дня менструального цикла женщины. Прерывание беременности от зачатия до 22 недели относится к самопроизвольному выкидышу (частота встречаемости составляет 15–20%). Три и более потери беременности подряд расценивается как привычное невынашивание беременности (ПНБ) [1]. Этиология НБ многообразна, где важное значение принадлежит иммуногенетическим факторам, особенно в случаях НБ неясного генеза [2]. Известно, что под контролем «индивидуальных особенностей генотипа» (однонуклеотидные полиморфизмы генов цитокинов, например) находятся механизмы иммунологической толерантности, формирующиеся и реализующиеся в отношении аллогенного плода [3].

Целью исследования было изучение влияния полиморфного варианта гена IL6 (rs1800795, С174G) на клеточные факторы иммунитета у женщин с НБ, проживающих на территории г. Челябинска и Челябинской области.

В исследовании приняли участие 174 женщины репродуктивного возраста, из них 63 пациентки (36,2%) с диагнозом НБ, 39 пациенток (22,4%) с диагнозом привычное невынашивание беременности (ПНБ) и 72 условно здоровые женщины (41,4%), имеющие 2 и более реализованные беременности в паре с одним и тем же партнером, без отягощенного акушерско-гинекологического анамнеза (контрольная группа). 

Исследовали периферическую кровь пациенток в I фазу менструального цикла. Материалом для генотипирования послужили образцы ДНК, полученные из лейкоцитов периферической венозной крови обследуемых женщин с использованием коммерческого набора реагентов «К-Сорб-100» (ЗАО «Синтол», Россия). Для анализа SNP гена IL6 (rs1800795, С174G)применяли метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени на амплификаторе «Rotor-Gene» («Corbett Research Pty Ltd.», Австралия) с использованием праймеров и зондов производства ЗАО «Синтол» (Россия) согласно инструкции фирмы-производителя.

С целью количественной оценки содержания клеточных факторов иммунитета определяли гематологические показатели с помощью автоматического гематологического анализатора MEDONIC M16 (Boule Diagnostics AB, Швеция) и содержание лимфоцитов и их субпопуляционный состав методом проточной цитофлуориметрии на аппарате Navios™ (Beckman Coulter, США) c использованием конъюгатов моноклональных антител: CD45-PC7, CD3-PE, CD4-FITC, CD-8-PC5.5, CD-3-FITC/CD19-PE, CD3-FITC/CD(16+56)-PE, CD-25-PE, СD3-FITC/HLA-DR-PE (Beckman Coulter, США), CD183-PerCP/Cy5.5, CD194-APC, CD196-PE/Cy7 (BioLegend, США).

Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием программ StatTech v. 2.8.8 (разработчик — ООО «Статтех», Россия) и PAST v. 4.05.

Количественные показатели оценивались на предмет соответствия нормальному распределению. Сравнение групп по количественному показателю, имеющему нормальное распределение, при условии равенства дисперсий выполнялось с помощью t-критерия Стьюдента. Сравнение групп по количественному показателю, распределение которого отличалось от нормального, выполнялось с помощью U-критерия Манна-Уитни.

Сравнение процентных долей при анализе многопольных таблиц сопряженности выполнялось с помощью критерия хи-квадрат Пирсона. При слабой насыщенности таблиц (n < 5), оценку статистической значимости проводили рандомизационной техникой Монте-Карло (n = 99 999). С целью определения ячеек таблиц сопряжённости, обеспечивших статистическую значимость выявленных эффектов, рассчитывали отклонения Фримана-Тьюки FT_dev и оценивали их статистическую значимость.  

Различия считали статистически